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huHSC-NCG

业务简介

huHSC-NCG小鼠人造血干细胞HSC)移植到重度免疫缺陷小鼠NCG体内,从而获得的重建人免疫系统的NCG模型。

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huHSC-NCG小鼠人源化模型实验设计流程图

 

药康优势

集萃药康自主研发的NCG小鼠是使用基因编辑技术敲除了NOD/ShiltJNju小鼠的Prkdc及Il2rg基因而获得的重度免疫缺陷品系。NCG小鼠具有T细胞、B细胞、NK细胞缺失的特征是迄今为止免疫系统缺陷最为彻底的小鼠模型,非常适合人外周血单个核细胞PBMC)人源造血干细胞CD34+HSC)移植进行免疫重建。

NCG小鼠上移植CD34+HSC后免疫重建效率高,主要重建T细胞和大量未成熟B细胞,少量NK细胞巨噬细胞,可用于进行多种肿瘤免疫药物的评价。

 

业务详情

1.NCG小鼠清髓效果检测

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 由于辐照可以清除小鼠骨髓中的造血干细胞,从而提高人源HSC移植后的重建水平,因此选用辐照处理后的NCG小鼠移植人源HSC。利用流式细胞技术检测辐照清髓效果。其中mCD45为小鼠白细胞标记物,mCD117为造血干细胞标记物。上图显示辐照后mCD45+mCD117+细胞群体比例为1.11%,显著低于未辐照组(13.5%)。表明150cGys剂量辐照6-7周NCG小鼠可达到理想的清髓效果。

2.huHSC-NCG小鼠的生存曲线及体重变化情况

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左图:小鼠生存生长曲线  右图:小鼠体重变化曲线 

huHSC-NCG小鼠存活时间可超过37周,且生存率与NCG野生型小鼠无显著差异。huHSC-NCG小鼠体重随时间变化呈增长趋势,前期与NCG野生型小鼠体重无显著差异,随着时间延长,huHSC-NCG小鼠体重下降,在实验终点,huHSC-NCG小鼠体重显著低于NCG野生小鼠(***P < 0.001)。数据以Mean ± SEM形式呈现。

3.huHSC-NCG小鼠外周血白细胞水平

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利用流式细胞技术检测huHSC-NCG小鼠人源化进程中外周血中人白细胞水平。随着时间推移,huHSC-NCG小鼠体内人白细胞含量逐步提高,反映人免疫系统重建的进程。数据以Mean ± SEM形式呈现。

4.huHSC-NCG小鼠外周血人T细胞与B细胞水平

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利用流式细胞技术检测huHSC-NCG小鼠进程中外周血中T细胞和B细胞水平。huHSC-NCG免疫系统重建早期,有大量未成熟、无功能的B细胞产生,随着时间推移,人B细胞比例逐步降低,T细胞水平逐渐增加。数据以Mean ± SEM形式呈现。

5.huHSC-NCG小鼠外周血hCD4+,hCD8+T细胞分布

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 利用流式细胞技术检测huHSC-NCG小鼠进程中外周血中hCD4+T和hCD8+T细胞的变化情况。数据以Mean ± SEM形式呈现。

6.huHSC-NCG小鼠外周血Treg细胞分布

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利用流式细胞技术检测huHSC-NCG小鼠进程中外周血中hCD25+hCD127-Treg细胞水平。数据以Mean ± SEM形式呈现。

7.huHSC-NCG小鼠人源化进程16周时人源化免疫细胞图谱

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 16周时对huHSC-NCG小鼠外周血进行流式分析,可在huHSC-NCG小鼠外周血中检测到多种人源免疫细胞,其中人白细胞比例高达50.1%(人白细胞比例高于20%则认为建模成功),表明本研究中huHSC-NCG人源化模型成功建立

品系名称:huPBMC-NCG

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