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原来你是这样的Ddx4-Cre
发布时间:2019-12-26

随着现代社会节奏越来越快,年轻人的生活工作压力愈渐加大,生殖问题逐渐凸显。近年来,生殖方向成为热门研究领域

说到生殖不得不提到Ddx4基因。Ddx4是目前已知的唯一对生殖细胞系完全特异的基因,因此被广泛用作生殖细胞的分子标记物,在动物生殖细胞发生和生殖调控等研究中起到了重要的作用,广泛用于研究精子的发生原始生殖细胞起源迁徙分化等方面。


Ddx4基因在果蝇、斑马鱼、小鼠等生物的生殖细胞中特异性表达。在小鼠中,Ddx4在原始生殖细胞(PGCs)中表达,我们可以在小鼠12.5d胚龄时就可以在生殖脊中检测到Ddx4的表达,整个表达一直维持至后期精子细胞和原代卵母细胞。

Ddx4-Cre(又可称为Vasa-Cre)转基因小鼠在小鼠Ddx4启动子的调控下,在雄性和雌性胚胎生殖细胞中特异表达Cre重组酶。Ddx4-Cre小鼠可用于在雄性和雌性生殖细胞中进行基因的条件性敲除,以此来研究生殖细胞相关机制。其特异性的表达以及效率表明了它将成为生殖细胞功能、性腺发生和配子发生等发育与生殖学方向的研究的有效工具。

根据Teresa等的研究发现,通过使用雄性Ddx4-Cre小鼠与雌性Gt(ROSA)26sor lacZ小鼠配繁,在双阳性后代小鼠的睾丸(E)和卵巢(F)中有明显的表达,而其他组织,包括肾,肝,肺,子宫均没有明显的表达(A-D)。也存在少数动物(<20%)表现出全身性表达。

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一般建议使用5-6周龄,最大不超过9周的雄性Ddx4-Cre小鼠配繁。使用雌性Ddx4-Cre小鼠配繁时发现,几乎所有的后代会发生全身性基因重组。而使用雄鼠配繁时,发生全身性基因敲除的概率相对较低,这种效应的基础尚不清楚,但可能与精子中Cre蛋白的存在有关。但当雄鼠周龄偏大(大于9周)时,后代也几乎会发生全身性重组。

目前对于使用Ddx4-Cre小鼠的性别、周龄有着一定的限制,但是只要我们能够科学的运用该小鼠,对于研究生殖细胞的相关机制它仍是十分有利的工具。


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参考文献:
1.Gallardo T , Shirley L , John G B , et al. Generation of a germ cell﹕pecific mouse transgenic Cre line, Vasacre[J]. genesis, 2007, 45(6):413-417.
.2Tanaka S S , Toyooka Y , Akasu R , et al. The mouse homolog of Drosophila Vasa is required for the development of male germ cells[J]. Genes Dev, 2000, 14(7):841-853.
3.Fujiwara Y, Komiya T, Kawabata H, Sato M, Fujimoto H, Furusawa M, Noce T. Isolation of a DEAD-family protein gene that encodes a murine homolog of Drosophila vasa and its specific expression in germ cell lineage. Proc Natl Acad Sci. 1994;91:12258–12262.